名  稱(chēng)：小鼠 HMGB1 ELISA試劑盒 （酶聯(lián)免疫檢測(cè)法）

英　文： HMGB1 ELISA Kit

規(guī)  格： 96T/48T

運(yùn)  輸： 快遞（生物干冰或冰袋運(yùn)輸）

品  牌： 酶聯(lián)生物

預(yù)期應(yīng)用：ELISA法定量測(cè)定血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中BAP含量

操作注意事項(xiàng)：

1) 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。

2) 稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

3) 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

4) 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好，不同批號(hào)的試劑不要混用。

5) 吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。

6) 使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

7) 不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

8) 底物易揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。

9) 按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

操作步驟：

1)標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋?xiě)?yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存，稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。

2)洗滌緩沖液(50×)的稀釋?zhuān)赫麴s水50倍稀釋。

3)使用前，將所有試劑充分混勻，不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫。

4)根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。

5)每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔，標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。

6)加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。

7)蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。

8)甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干，重復(fù)此操作3次。

9)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

10)甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。

11)每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘，避免光照。

12)取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。

13)在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

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